Sowohl Fotoamateure als auch Profifotografen sieht der Hersteller als mögliche Nutzer der Kamera. Mit ihren 6,1 Megapixel ist sie in der Lage, Bilder mit einer Auflösung von rund 3.000 x 2.000 Pixel zu erzeugen. Zu den Funktionen der D100 gehören unter anderem eine variable Tonwertkorrektur, ein 5-Segment-Autofokus, eine integrierte Rauschunterdrückung und eine 3D-Matrixmessung zur Belichtungskontrolle. Mit den rund vierzig Wechselobjektiven des Typs Nikkor AF sowie mit diversen Blitzgeräten, darunter auch der neue Nikon SB-80DX, ist die D100 kompatibel. Die Verschlußzeiten reichen bis zu 1/4.000 Sekunde. Zur Datenspeicherung lassen sich Compact-Flash-Karten vom Typ I und II sowie die IBM-Microdrive-Karte nutzen.
Im Lieferumfang enthalten ist die Software Nikon View 5 zur Bildübertragung und -verwaltung. Optional erhältlich ist die Nikon-Software Capture 3, mit der es beispielsweise möglich ist, die D100 vom Rechner aus fernzusteuern.